試劑盒未提供的材料

1.    蒸餾水或去離子水

2.    可吸取50ul的移液器及吸頭

3.    可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸頭

4.    吸水紙或相當(dāng)?shù)奈牧?/p>

5.    帶450nm濾光片的酶標(biāo)儀

6.    計(jì)時(shí)器

7.    洗瓶

8.    20mM PBS： 0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl  蒸餾水定容至1000ml

試驗(yàn)準(zhǔn)備

干貓糧的提取方法：稀釋系數(shù)：10

1)用攪拌機(jī)均質(zhì)干貓糧樣品。

2)稱(chēng)取1 g均質(zhì)樣品，加10 mL 20mM PBS。

3)劇烈渦旋振蕩后超聲裂解樣品1min。再次振蕩1min后靜置5min。

4)10 000rpm離心10min。

5)用G6玻璃濾紙過(guò)濾清澈的上層相，然后用干凈的瓶子儲(chǔ)存提取液。

6)提取液樣品可直接用于試驗(yàn)。

備注：如果沒(méi)有玻璃濾紙可以用性濾器和性針筒過(guò)濾。

檢測(cè)步驟  (注意: 標(biāo)準(zhǔn)及樣品做平行試驗(yàn)以增加準(zhǔn)確度.)

1.    將所有試劑及樣品置于室溫下，用實(shí)驗(yàn)室級(jí)的水充滿(mǎn)洗瓶。

2.    從鋁箔袋中取出相應(yīng)數(shù)量的微孔條，放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。

3.    吸取100ul標(biāo)樣或稀釋的樣品提取液到相應(yīng)的微孔。每個(gè)樣品使用一個(gè)新的吸頭。每孔加50ul三聚氰胺HRP酶標(biāo)記物。

4.    輕輕混合60秒，孵育30分鐘。

5.      孵育完后，將微孔中的溶液倒入水槽中，用洗液完全充滿(mǎn)微孔，震蕩后倒掉，重復(fù)三次，總共洗板四次。

6.      在吸水紙上拍打，盡可能將水拍干。

7.      每孔加入100ul底物溶液。

8.      孵育20分鐘。

9.      每孔加入100ul終止液。

10.   用酶標(biāo)儀讀取450nm下的吸光值。我中心提供檢測(cè)三聚氰胺所需全部試劑，設(shè)備，如有需要請(qǐng)來(lái)電!聯(lián)系電話(huà)：

提供的產(chǎn)品有：

甲醇：色譜純。

乙腈：色譜純。

氨水：含量為25％～28％。

三氯乙酸。

檸檬酸。

辛烷磺酸鈉：色譜純。

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品

混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱

微孔濾膜

高效液相色譜(HPLC)儀

分析天平

離心機(jī)

超聲波水浴

固相萃取裝置

氮?dú)獯蹈蓛x

渦旋混合器

具塞塑料離心管

色譜柱：C8柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm

C18柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm

吡啶：優(yōu)級(jí)純。

衍生化試劑

酶標(biāo)儀

三聚氰胺試劑盒