液相色譜C18柱

產(chǎn)地：大連中匯達(dá)、天津艾杰爾、蘭化所

填料：Krommasil Hypersil  Spherisorb LiChrosorb YWG  Promosil  Akasil SinoChrom系列

內(nèi)徑：4.0mm 4.6mm

填料粒度：5.0um 10um

長度：150mm 200mm 250mm

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鹽城科爾化工有限公司

傅懷臣：     QQ:

液相色譜柱都是按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)和測試的，如能按照以下信息使用和維護(hù)色譜柱，不但能得到更佳的檢測結(jié)果，更能夠延長色譜柱的使用壽命。

色譜柱的安裝：

1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線，同時控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前，確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。

2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)的連接效果，應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭，如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱，建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況，避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。

3、使用PEEK材料的通用接頭，只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手，使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過100℃。

流動相平衡：

1、在進(jìn)行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應(yīng)當(dāng)天配制以保持新鮮避免細(xì)菌產(chǎn)生。

2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱，以免柱性能損壞（添加5％的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱，同時可以達(dá)到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡）。

3、流動相需脫氣后使用，可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別，應(yīng)該使用過度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。

樣品制備與操作：

1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強(qiáng)溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。

2、樣品溶液在進(jìn)樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效。

3、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得分離效果，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外操作溫度不要超過60℃。

保存色譜柱：

1、如果流動相含有酸或無機(jī)鹽，應(yīng)當(dāng)先用去離子水（20倍柱體積）沖洗干凈。然后用用100％乙腈或甲醇保存色譜柱。后用柱子的接頭密封，并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放。

2、應(yīng)避免色譜柱受到直接的機(jī)械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低。

色譜柱的再生：

1、用相當(dāng)于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子，建議按柱子的箭頭方向沖洗，盡可能不反沖：沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇、甲醇。

                                     如何延長液相色譜柱的使用壽命    色譜柱是高效液相色譜儀重要的部件，對樣品的分離優(yōu)劣起關(guān)鍵作用，若使用不當(dāng)，會出現(xiàn)理論塔板數(shù)下降，色譜峰型變壞，柱壓力降增大、保留時間改變等不良現(xiàn)象，從而大大縮短色譜柱的使用壽命。為了延長液相色譜柱的使用壽命，有以下幾點建議供大家參考：
    1、使用“保護(hù)柱”，能夠延長色譜柱的使用壽命。正確使用裝在液相色譜柱前面的“保護(hù)柱”，可以阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質(zhì)，而達(dá)到延長柱子壽命的效果。如果使用“保護(hù)柱”不當(dāng)會造成反效果，因為在保護(hù)柱使用過程中，如污染達(dá)到一定程度而沒有及時更換。累積的雜物很可能會沖入色譜柱中，反而會造成色譜柱損壞。因此，使用“保護(hù)柱”時，要及時進(jìn)行更換。
　　2、選擇高品質(zhì)的柱子，并注意使用方法，可以延長柱子的使用壽命。選用柱子時必須選擇管理嚴(yán)格的高品質(zhì)柱子，我們知道，任何柱子使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下使用，柱子更易產(chǎn)生變化。因此，應(yīng)盡量選用PH適用范圍大的柱子。大多數(shù)反相色譜柱的PH穩(wěn)定范圍是2-7.5，盡量不超過該色譜柱的PH范圍。在開發(fā)新分析方法時，許多建議不要使用舊柱子，因柱子一經(jīng)使用，柱性會改變，如此一來，使用舊柱子開發(fā)出來的新分析方法，很可能再使用同廠牌的新柱子分析時，發(fā)生無法達(dá)到預(yù)定效果的情況。總的說，開發(fā)新分析方法時要使用品質(zhì)好的新柱子，并且一支柱子使用在一種分析方法上；則柱子壽命可以延長。
　　3、定期沖洗柱子可以延長柱子使用壽命。我們知道柱子使用一段時間后總會有一些雜物累積在柱內(nèi)，這些雜物不會隨著流動相出來，自然會逐漸影響柱子的品質(zhì)。這些雜物在后來的分析譜圖上出現(xiàn)，而造成出現(xiàn)怪峰、基線不平等現(xiàn)象。簡單的解決方法是用較強(qiáng)的流動相沖洗，是在每次分析某一產(chǎn)品完成后沖洗。沖洗時先使用有機(jī)和水的混合溶液為流動相沖洗緩沖劑，接著再用100%有機(jī)溶劑沖洗。如果不先用有機(jī)溶劑和水的混合溶液沖洗，而直接用100%有機(jī)溶劑沖洗的話，緩沖劑很可能會沉淀出來，而損壞柱子的品質(zhì)。使用10-20倍柱體積的量來沖洗基本就足夠了。建議將100%有機(jī)溶劑沖洗的條件加在分析實驗程序完畢地后，如此一來每天在開機(jī)前都會用100%機(jī)溶劑沖洗。一般硅膠柱可以反沖洗處理，即在將沖洗前將柱子倒反接后再沖洗。
　　4、分析中使用的流動相應(yīng)有高純度且必須進(jìn)行過濾、脫氣處理，以防微量雜質(zhì)在柱中積累，引起柱子性能的改變。也可防止檢測池中存在氣泡會增加基線噪聲，嚴(yán)重時會造成分析靈敏度下降。
　　在工作中注意以上幾點，就能延長色譜柱的使用壽命，提高分析速度。